全细胞差减筛选法筛选与人卵巢癌细胞特异性结合的短肽
目的 全细胞差减法筛选人源性卵巢癌HO8910细胞株特异性结合短肽,为卵巢癌的靶向药物治疗提供理想的载体.方法 以人卵巢癌HO8910细胞为靶细胞,人正常卵巢上皮细胞为吸附细胞,对噬菌体随机环7肽库进行4轮差减筛选;ELISA验证阳性噬菌体克隆;对获得的阳性克隆进行DNA测序及生物信息学分析,采用免疫荧光细胞化学方法鉴定噬菌体阳性克隆(phage1)与HO8910细胞的特异性结合.结果 经过4轮筛选后,噬菌体在靶细胞HO8910上出现了明显的富集现象;ELISA对20个随机挑选的克隆进行鉴定,12个可与HO8910特异性结合;DNA测序后得到一段与卵巢癌细胞特异性结合的7肽(SWQIGGN),免疫荧光细胞化学结果显示phage1能特异性结合HO8910细胞.结论 采用全细胞差减法成功筛选到与卵巢癌细胞特异性结合的7肽.
卵巢癌、噬菌体展示、全细胞、差减筛选、靶向性
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R737.31;R392-33;Q811.4(肿瘤学)
广州市科学技术局11A53150713;广东省自然科学基金S2012010009341
2013-10-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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