小鼠多囊蛋白1氨基端多克隆抗体的制备和其生物特性分析

摘要：

目的 制备针对多囊蛋白1(PC1)胞外区的抗体,为分析PC1胞外区生物特性和功能提供工具.方法 根据生物信息学分析结果,PCR扩增编码小鼠Pkd1的氨基端474E-640L的eDNA片段.将该片段克隆到GST融合蛋白表达载体上,在IPTG诱导下产生小鼠Pkdl抗原(mPkd1-N).纯化浓缩目的蛋白并制备兔抗PC1氨基端多克隆抗体(mPkd1-Np),并以Western blot法、免疫组化以及免疫荧光方法分析该兔抗PC1氨基端抗体的特异性.结果 成功地构建了mPkd1-N片段真核及原核表达载体,在大肠杆菌中实现表达,并制备了抗小鼠PC1氨基端的多克隆抗体mPkd1-Np.通过生化和细胞学方法证实了该抗体针对PC1的特异性.结论 成功制备了高效价、特异性的兔抗mPkdl-Np多克隆抗体.

关键词：Pkd1基因、polycystin-1、多克隆抗体、常染色体显性遗传多囊肾病

所属期刊栏目：29

分类号：R392.11;R692.1+2

资助基金：国家重点基础研究发展计划973资助2012CB517700;国家自然科学基金81072688,81173114;科技部院校发展基金2011-EG150311;北京市自然基金5112031,7102133

在线出版日期：2013-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：723-728,733