辐射损伤导致造血干/祖细胞衰老的机理研究

摘要：

目的 探讨辐射损伤导致骨髓造血干/祖细胞(HSC/HPC)衰老的可能机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠随机分为辐照组和假辐照组,辐照组小鼠经6.5 Gy的X射线全身一次性辐照,假辐照组小鼠处理同辐照组,但不辐照.辐照后24 h免疫磁珠分选法分离并计数两组小鼠的Sca-1+造血干/祖细胞细胞(Sca-1+ HSC/HPC),流式细胞术检测细胞周期,β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老细胞百分率；混合造血祖细胞集落(CFU-Mix)培养观察分选细胞增殖分化能力,单细胞凝胶电泳(SCGE)检测辐照导致细胞的DNA损伤,RT-PCR检测细胞衰老相关基因p16INK4a、p19Arf、p53、p21 Cipl/wafl mRNA的表达；Western blot法检测p16INK4a、p21Cipl/Wafl蛋白表达.结果 免疫磁性分析法分离纯度的Sca-1+ HSC/HPC可达94％,辐照后小鼠每支股骨的Sca-1+ HSC/HPC数量急剧下降,细胞出现G1期阻滞；形成CFU-Mix集落数量和形成集落的细胞数明显降低；SA-β-Gal染色阳性率显著增高,彗星实验显示细胞拖尾明显延长；p16INK4a、p19Arf、p53、p21cipl/wafl mRNA表达明显增强,p16INK4a、p21Cipl/Wafl蛋白的表达水平上调.结论 辐射导致HSC/HPC DNA的损伤和衰老相关生物学改变,p16INK4a-Rb和p19Arf-p53-p21 Cipl/Wafl信号通路可能起一定作用.

关键词：造血干/祖细胞、电离辐照、细胞衰老、DNA损伤

所属期刊栏目：29

分类号：R329.2(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金81173398,30973818,30970872

在线出版日期：2013-04-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：233-236,241