抗人Apo B100单克隆抗体的制备及夹心ELISA检测方法的建立

摘要：

目的:制备抗人载脂蛋白B100( Apo B100)单克隆抗体(mAb),建立入Apo B100双抗体夹心ELISA检测方法.方法:将人Apo B100抗原免疫小鼠,通过细胞融合、筛选后得到杂交瘤细胞株.将细胞株用无血清培养基扩大培养并纯化上清获得抗体,测定抗体亲和力、亚型、特异性及表位,最后建立双抗体夹心ELISA方法.结果:获得4株抗人Apo B100的杂交瘤细胞株(4-1-2、4-2-2、4-3-2、4-6-3),其分泌的抗体不与其他相关蛋白交叉反应,亲和力达到1×109 L/mol.用4-3-2和4-6-3建立的双抗体夹心法的检测范围为(1.3 ～80)ng/mL,灵敏度1.24 ng/mL,批内变异系数均小于10％,批间变异系数均小于15％,回收率在90％以上.结论:成功制备了抗人Apo B100 mAb,建立了定量检测人Apo B100的双抗体夹心ELISA方法,为Apo B100检测及疾病的诊断奠定基础.

关键词：人载脂蛋白B100、单克隆抗体、夹心ELISA

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11;R392-33

资助基金：黑龙江省发展高新技术产业专项资金FW11C201;大庆市科技计划scyc-2010-62;大庆高新区科技专项资金DQGX10ZS005

在线出版日期：2012-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：726-729