牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB-GITRL真核共表达载体的构建及免疫原性研究

摘要：

目的:构建牙龈卟啉菌外膜蛋白ragB和小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体( mGITRL)真核共表达载体,在体内研究其免疫原性.方法:应用PCR扩增技术,从pMD18-T-ragB中获得ragB基因编码序列片段,克隆至真核共表达载体pIRES及pIRES-mGITRL.对重组质粒进行双酶切与测序鉴定后,以脂质体介导法转染至COS7细胞,通过Western blot检测其在COS7细胞中的表达.将成功构建的重组质粒免疫小鼠,应用ELISA法检测免疫后小鼠血清中抗RagB的水平.结果:PCR扩增目的基因,酶切和测序证实重组质粒pIRES-ragB及pIRES-ragB-mGITRL成功构建,Western blot结果显示目的基因在COS7细胞及骨骼肌细胞中均过表达.小鼠血清中检测出高滴度的抗RagB的抗体.结论:pIRES-ragB-mGITRL表达载体的构建,为牙龈卟啉菌疫苗研究、预防和牙周炎治疗提供了实验依据.

关键词：牙龈卟啉菌、RagB、小鼠糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体、免疫原性

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11

资助基金：江苏省博士后启动基金1102129C;镇江市国际合作交流项目GJ2010007;江苏大学高级人才启动项目11JDG128;中国博士后基金2012M511705

在线出版日期：2012-08-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：588-591