CTLA4.FasL双功能融合基因真核表达载体的构建与表达
目的:构建携带CTLA4.FasL双功能融合基因的真核表达质粒,并在HEK293细胞中表达.方法:PCR扩增得到CTLA4和FasL胞外区编码序列,后用重叠PCR的方法将该两段序列融合,且在两者间插入接头序列(编码一柔性短肽GGSGG),所得的基因片段命名为CTLA4.FasL.Xho Ⅰ/Kpn Ⅰ双酶切后,定向克隆至质粒pcDNA3.1(-),构建成真核表达载体pcDNA3.1(-)-CTLA4.FasL.转染入HEK293细胞,RT-PCR和Western blot验证融合基因的表达.结果:重叠PCR扩增获得CTLA4.FasL融合基因.真核表达载体pcDNA3.1(-)-CTLA4.FasL成功构建,并在HEK293细胞表达.结论:成功构建了携带双功能融合基因的真核表达载体,为利用CTLA4.FasL基因修饰肝干细胞用于同种细胞移植治疗奠定了基础.
肝干细胞移植、基因治疗、融合蛋白
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R392.4;R575.3
国家自然科学基金30600575
2012-03-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
167-169
