抗ICAM-1单克隆抗体的制备与特性鉴定
目的:制备有生物学活性的抗人细胞间黏附分子-1( ICAM-1)单克隆抗体(mAb)并进行特性鉴定.方法:以纯品ICAM-1为抗原免疫BALB/c小鼠4次.采用杂交瘤技术,经3次亚克隆筛选稳定分泌抗人ICAM-1 mAb的杂交瘤细胞株.采用动物体内诱生的方法大量制备mAb.以protein G对其进行纯化后,用间接ELISA法测定mAb的效价并鉴定其Ig亚类.用Western blot鉴定mAb的特异性.结果:筛选出4株可稳定分泌抗人ICAM-1 mAb的杂交瘤细胞株,分别命名为B9株、F1株、C11株和D6株.4株mAb的Ig亚类均为IgG1.4株mAb培养上清的效价均为1∶1 000;腹水的效价B9株与D6株为1∶2×105,F1株与C11株为1∶4×105.纯化后mAb的蛋白浓度为1.2 g/L,均可与ICAM-1特异性结合.结论:成功制备出效价高、特异性良好的4株抗ICAM-1 mAb,为进一步研究ICAM-1的生物学功能和临床应用奠定了基础.
细胞间黏附分子-1、单克隆抗体、杂交瘤技术
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R392.12
2012-01-18(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
1212-1214