顶体素结合蛋白真核表达载体的构建及其在肝癌细胞株的表达

摘要：

目的:构建ACRBP真棱表达载体,建立稳定表达ACRBP的人肝癌细胞株,为后继研究该基因的功能奠定基础.方法:以pMAL-C2/ACRBP重组质粒作为模板进行PCR,扩增出ACRBP编码区cDNA,并与真核表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-N1/ACRBP重组质粒.通过Fugene HD将该重组质粒转染至ACRBP表达阴性的肝癌细胞株HepG2,经G418筛选阳性克隆获得稳定转染株.RT-PCR和免疫组织化学方法检测HepC-2细胞中ACRBP的表达情况.结果:pEGFP-N1/ACRBP真核表达载体经测序证实插入序列完全正确；ACRBP基因已经稳定转染至HepG2细胞中并获得表达.结论:成功构建了pEGFP-N1/ACRBP真核表达载体并将其转染HepG2后,能稳定地表达ACRBP.

关键词：ACRBP、基用克隆、转染

所属期刊栏目：27

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金资助项目30760055,81060207;广西高发疾病研究创新性团队基金资助项目桂教人[2007-71]号;广西自然科学基金桂科自0832144;广西教育厅立项项目201010LX029;广西教育厅研究生创新计划项目2009105981001M190;广西医学科学实验中心开放项目KFJJ2010-33;广西大型仪器网协助项目6912008104

在线出版日期：2011-12-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1072-1074