H2-Bl基因转染对小鼠血管平滑肌细胞生物学行为的影响
目的:H2-Bl基因转染小鼠血管平滑肌细胞(VSMC),观察其凋亡、增殖和抗外周血单个核细胞(PBMC)杀伤性等生物学行为的变化,探讨借鉴母胎免疫耐受模型防治心脏移植术后免疫排斥反应的机制.方法:0.5 mg/L空质粒、0.5 mg/L H2-Bl质粒、1.0mg/L H2-Bl质粒转染小鼠血管平滑肌细胞后,采用实时荧光定量PCR、流式细胞术、酶标仪检测不同时间质粒的转染效率、H2-Bl基因mRNA的表达量、转染VSMC的凋亡与增殖情况以及PBMC对靶细胞的毒性作用.结果:荧光定量PCR结果显示,基因组的H2-Bl基因mRNA表达量明显高于对照组(P<0.001).H2-Bl基因促进VSMC凋亡,转染24 h后0.5 mg/L H2-Bl质粒组、1.0 mg/LH2-Bl质粒组与空白对照比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).H2-Bl基因抑制VSMC增殖,转染24 h和48 h后0.5 mg/L H2-Bl质粒组、1.0 mg/L H2-Bl质粒组与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01).细胞毒性试验在转染24 h后,0.5 mg/L H2-Bl质粒组、1.0mg/L H2-Bl质粒组细胞毒性均较空白对照明显降低(P<0.05,P<0.01).结论:pEGFP-N1-H2Bl质粒载体转染小鼠VSMC后,能够有效促进其凋亡,抑制其增殖,降低PBMC对靶细胞的毒性作用,诱导免疫耐受.
血管平滑肌细胞、H2-Bl基因、凋亡、增殖、外周血单个核细胞
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R654.2(外科学各论)
国家自然科学基金资助项目30772151;山西省自然科学基金资助项目2008011079-3;山西省卫生厅科技攻关基金资助项目200622
2011-04-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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