缺失PRD的人FOXP3单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的:制备抗脯氨酸富含区缺失的人FOXP3(△PRD-hFOXP3)的单克隆抗体(mAb),为进一步研究人FOXP3各片段功能奠定基础.方法:以纯化的△PRD-hFOXF3重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞Sp2/0进行常规融合,经筛选及克隆化建立2株分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb杂交瘤细胞株;利用核型分析、间接ELISA及Western blot分别鉴定了杂交瘤的细胞核型、抗体的效价与特异性.结果:筛选到2株可稳定分泌抗△PRD-hFOXP3的mAb的细胞株,分别命名为1A2和3A11;2株抗体均为IgG1,腹水经ELISA方法测定效价均可达1:105;Western blot显示这2株杂交瘤分泌的mAb均可与△PRD-hFOXP3蛋白特异性地结合.结论:成功获得2株能稳定分泌特异性抗△PRD-hFOXP3的mAb的杂交瘤细胞株,可用于人FOXP3的进一步研究及相关试剂的研发等.

关键词：PRD-hFOXP3蛋白、杂交瘤细胞株、单克隆抗体

所属期刊栏目：26

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金资助项目30671984;江苏大学科技创新团队资助项目2008-018-02

在线出版日期：2011-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：566-568