体外诱导人类B细胞分泌HLA抗体的实验研究

摘要：

目的:探索体外诱导人类B细胞产生特异性HLA抗体的理想培养条件.方法:以EBV转化致敏肾移植患者B淋巴细胞系(BLCL)为模型, 采用ELISA和ELISPOT方法, 比较3种培养体系:(1)RPMI1640+抗OPTI单克隆抗体(mAb);(2)RPMI1640+ 0.1 mmol/L非必需氨基酸液+1 mmol/L丙酮酸钠+ 40 mg/L转铁蛋白;(3)Hybridoma无血清培养液, 以及3种培养条件:(1)对照组(仅培养液), (2)培养液+rIL- 4+rIL-10+鼠抗人CD40(α-CD40), (3)培养液+rIL- 4+rIL-10+重组人CD40配体(CD40L), 人类B细胞产生免疫球蛋白(Ig)和特异性抗HLA抗体的能力.结果:BLCL细胞在Hybridoma SFM培养体系所产生的IgG和IgM浓度分别为25.2 ～28.1 mg/L和7.14 ～7.95 mg/L, 高于其他两种培养条件(P＜0.05).BLCL细胞在添加了IL- 4、IL-10和α-CD40或CD40L的杂交瘤无血清培养液中能产生特异性抗HLA-I抗体, 所获得的斑点频数分别为3.06/每104个BLCL细胞和3.55/每104个BLCL细胞, 高于对照组(1.77/每104个BLCL细胞).结论:BLCL细胞在杂交瘤无血清培养液中和添加了IL- 4、IL-10和α-CD40或CD40L的培养条件下, 提高分泌IgG和IgM的能力和特异性抗HLA-I类分子的抗体.

关键词：B淋巴细胞、HLA抗体、酶联免疫斑点法

所属期刊栏目：23

分类号：R593(全身性疾病)

资助基金：国家自然科学基金30571710

在线出版日期：2007-07-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：641-644