大鼠骨髓间充质干细胞分离培养方法的建立及其表型分析

摘要：

目的:探讨体外分离培养大鼠间充质干细胞(MSC)的方法,并对其进行表型鉴定及黏附分子测定.方法:采用全骨髓直接贴壁法获得原代大鼠骨髓MSC,差速贴壁结合消化控制法纯化细胞,Ⅰ型胶原作为细胞外基质扩增MSC;镜下观察细胞生物学形态及生长状态,流式细胞仪检测第4代MSC的细胞周期,免疫细胞化学方法对其进行表型鉴定与细胞黏附分子检测.结果:原代培养的MSC呈圆形、梭形、多角形等,24 h内即可见少量细胞体壁伸展,7～8 d左右可达90%融合,纯化扩增后的MSC呈均匀一致的长梭形,24 h内细胞已基本贴壁,传代周期为5 d左右.流式细胞术检测显示,第4代MSC约有80%处于G0/G1期.免疫细胞化学显示,MSC CD34、CD45表达阴性,CD29、CD105、CD166、VLA-4、P-selectin表达阳性.结论:本实验方法能很容易地获得大量高纯度的MSC,并表达一定的黏附分子,为MSC进一步临床应用打下了良好的基础.

关键词：骨髓间充质干细胞、分离培养、表型、黏附分子

所属期刊栏目：23

分类号：S865.12(狩猎、野生动物驯养)

资助基金：山东省自然科学基金Y2005C21;山东省科技攻关项目2006GG2202015

在线出版日期：2007-08-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：466-468