人MUC1与GM-CSF基因融合真核表达质粒的构建与表达

摘要：

目的:构建人MUC1重复序列串联体基因与GM-CSF 基因重组的真核共表达质粒pcDNA3.1(+)-MUC1-GM-CSF, 并观察重组质粒在COS-7细胞中的表达.方法:将信号肽及编码MUC1基因片段合成、合成的片段经退火等方法获得MUC1基因重复序列串联体,酶切鉴定及序列分析后, 与GM-CSF基因克隆入pcDNA3.1(+)真核表达载体中, 构建真核共表达质粒pcDNA3.1(+)-MUC1-GM-CSF.以重组质粒转染COS-7细胞, 通过间接免疫荧光法及ELISA检测目的基因的表达.结果:酶切鉴定及序列分析表明, 重组质粒含有人MUC1重复序列串联体与GM-CSF 的融合基因, 在COS-7细胞中可检测到MUC1表达, 重组质粒免疫小鼠可诱导产生抗GM-CSF抗体.结论:人MUC1重复序列串联体与GM-CSF基因重组的真核共表达质粒的成功构建, 为对其免疫原性、生物学特性及免疫治疗的进一步研究奠定了基础.

关键词：基因工程、MUC1、GM-CSF、共表达载体、COS-7细胞

所属期刊栏目：23

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30571802;陕西省自然科学基金2004C2-36

在线出版日期：2007-03-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：18-20,24