小鼠气道杯状细胞钙激活氯离子通道胞外段基因的克隆及表达

摘要：

目的: 克隆并表达小鼠气道杯状细胞的特定钙激活Cl-通道(mCLCA3). 方法: 根据GenBank(No.NM-017474)的信息, 设计针对mCLCA3的3个胞外段基因的引物.以重组质粒pcDNA3.1(-)/mCLCA3为模板, PCR法扩增3个胞外段的基因.将N端和C端胞外段基因分别亚克隆到原核表达载体pRSET-A中, 中间胞外段基因则亚克隆入原核表达载体pGEX-T1中.分别转化大肠杆菌BL21(DE3) 感受态细胞, 使用IPTG诱导表达.结果: 酶切鉴定和序列分析表明, 克隆的mCLCA3的3个胞外段基因序列与GenBank中登录的完全一致.将这些基因亚克隆到相应表达载体, 经IPTG诱导在大肠杆菌中获得表达, 并且表达产物主要以包涵体的形式存在. 结论: 获得了mCLCA3抗原分子胞外段基因及其原核表达产物, 对进一步制备单克隆抗体, 探讨mCLCA3的通道调控机制具有重要意义.

关键词：钙激活氯离子通道、哮喘、气道、杯状细胞

所属期刊栏目：20

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：陕西省科技攻关项目2003K10G55;陕西省西安市社会发展基金SF200337

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：340-343