hJagged1ext-Fc融合蛋白真核表达载体的构建和表达

摘要：

目的: 构建含人Jagged1胞外段-IgFc融合基因片段的质粒, 并在真核细胞中表达.方法: 从人骨髓细胞中用RT-PCR扩增hJagged1基因的胞外段. 经DNA测序后, 将hJagged1基因的胞外段插入改造过的质粒pBluescript skⅡ中, 获得hJagged1ext-Fc融合基因.将融合基因插入真核表达载体pEF-BOSneo, 构建真核表达载体pEF-BOSneo-hJagged1ext-Fc.以其瞬时转染COS7细胞, 应用RT-PCR、细胞免疫荧光技术, 及夹心ELISA检测融合蛋白的表达.结果: hJagged1基因的胞外段被有效地扩增.DNA序列分析表明, 所构建的含hJagged1ext-Fc融合基因的质粒与设计相同, hJagged1ext-Fc融合蛋白得到正确表达.结论: 成功地构建了hJagged1ext-Fc融合基因的真核表达载体, 并在真核细胞中正确表达, 为进一步研究Jagged1在造血干/祖细胞的体外扩增奠定了基础.

关键词：造血干/祖细胞、Notch、Jagged1、融合蛋白、真核表达

所属期刊栏目：20

分类号：R331.2;Q78(人体生理学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划973计划001-CB509906;国家自然科学基金30200148

在线出版日期：2004-08-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：278-281