10.3321/j.issn:1007-8738.2003.02.011
Der p2重组胞壁型E.coli-BCG穿梭表达载体的构建和鉴定
目的:构建能够携带外源蛋白屋尘螨抗原(Der p2)基因并能在胞壁表达的E.coli-BCG穿梭载体.方法:用PCR技术,从结核分支菌毒株H37Rv基因中,扩增结核分支杆菌19 kDa抗原的胞壁区及其上游调控元件(19-ss)基因,并克隆入含有Der p2基因的E.coli-BCG穿梭载体pOLYG中.用间接免疫荧光染色法,检测该载体能够携带并表达的Der p2基因在牡牛分支杆菌宿主中表达.[ HTH 结果:经测序证实,所克隆的19-ss基因序列正确.所构建的含有19-ss基因的E.coli-BCG穿梭载体(pCW)能完成在大肠杆菌和牡牛分支杆菌细胞之间的穿梭,并介导抗生素抗性基因表达.经免疫荧光检查,外源基因Der p2以脂蛋白的形式表达于分支杆菌宿主的表面.结论:成功地构建了以胞壁嵌合形式表达外源蛋白的E. coli-BCG穿梭载体.
尘螨抗原、分支杆菌、表达
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Q78(基因工程(遗传工程))
第四军医大学校科研和教改项目2001007
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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