10.3321/j.issn:1007-8738.2002.02.010
谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4融合蛋白表达载体的构建、鉴定与表达
目的构建谷胱甘肽转硫酶-血小板因子4(GST-PF4)融合蛋白表达载体,并研究其编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达.方法通过RT-PCR方法,从HL-60细胞中克隆PF4cDNA,然后克隆至载体pUC19中,序列测定后把PF4基因重组入谷胱甘肽转硫酶融合基因表达载体pGEX-4T-3中,并用IPTG诱导其在大肠杆菌中表达.结果获得了PF4cDNA.序列分析表明,该序列与GenBank数据库中的序列一致.重组质粒酶切鉴定表明,PF4基因已正确插入到pGEX-4T-3中.重组融合蛋白表达载体GST-PF4经IPTG诱导表达,在SDS-PAGE后得到1条蛋白表达带,相对分子质量(Mr)约为36000.结论成功地构建融合蛋白表达载体GST-PF4,并在大肠杆菌中获得有效表达,为进一步研究打下良好的基础.
血小板因子4、融合基因载体、表达
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Q786(基因工程(遗传工程))
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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