10.3321/j.issn:1007-8738.2002.02.004
抗人精浆蛋白单抗κ链基因的克隆及其在HeLa细胞的表达
目的获得鼠抗人精浆蛋白单抗(mAb)κ链基因,并将其转染到HeLa细胞进行表达.方法从分泌抗人精浆蛋白mAb的杂交瘤细胞系E4B7中提取总RNA,用RT-PCR法获取κ链cDNA.将其克隆入真核表达载体pcDNA3,用脂质体转染法转染HeLa细胞,并用免疫荧光染色法检测κ链的表达.结果从分泌抗人精浆蛋白的鼠mAb杂交瘤细胞系E4B7中克隆了κ链基因.序列测定表明,Vκ属于鼠免疫球蛋白ⅩⅢ家族.以含κ链基因的真核表达载体pcDNA3-E4B7κ转染HeLa细胞后,在HeLa细胞中检测到了κ链的表达.结论获得了序列正确的κ链基因,并在HeLa细胞中成功地表达,为进一步构建和表达Fab段打下了良好基础.
人精浆蛋白、单克隆抗体、免疫球蛋白κ链、基因表达
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R392.11
国家高技术研究发展计划863计划2001AA215321;教育部高校骨干教师资助计划2000-65-66;国家杰出青年科学基金39925036
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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