10.3321/j.issn:1007-8738.2001.03.011
幽门螺杆菌vac A基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达
目的构建幽门螺杆菌(Hp)Vac A基因片段原核表达载体并进行表达.方法采用PCR技术,扩增Hp vac A基因的1个片段B,并克隆入pGEM-3Zf(-)质粒.测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pILSE-TA-B.结果经过转化层 E.coil BL21 DE3(plysS)后,诱导表达出相对分子质量(Mr)为33 000的蛋白.SDS-PAGE分析显示,表达量占全菌总蛋白质的47.8%,上清中目的蛋白占全菌总蛋白的10.9%.ELISA和Western blot分析表明,表达蛋白能与兔抗Vac A多抗结合.结论成功地构建原核表达载体pRSETA-B,为进一步探讨该片段的生物学活性,以及临床上通过检测患者血清预测Hp的感染提供了实验依据.
幽门螺杆茵、vac A基因、原核表达载体、活性测定、构建、表达
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R537.6/R378.2(寄生虫病)
2004-01-08(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
237-240