人源抗丙型肝炎病毒噬菌体抗体库的构建及筛选

摘要：

目的构建人丙型肝炎病毒(HCV)特异性噬菌体抗体库,制备人源抗HCV单克隆抗体(mAb).方法用常规RT PCR法,直接从5例丙型肝炎患者外周血混合淋巴细胞中,扩增抗体重链Fd基因和κ轻链基因,与噬菌体载体pComb3连接,构建噬菌体抗体Fab库.对抗体库进行5轮吸附-洗脱-扩增的亲和选择后,以ELISA法鉴定抗HCV噬菌体抗体.结果RT PCR可有效地扩增出Fd和κ基因,并以此构建成容量为1.2×107的噬菌体抗体库.经5轮亲和选择可使特异性噬菌体抗体得到高度富集,抗HCV噬菌体抗体阳性克隆达96%.结论抗HCV噬菌体抗体库的构建和人源抗HCVmAb的制备,为HCV感染的诊断、治疗和发病机制的研究提供有效的分子工具.

关键词：噬菌体抗体库、HCV、人源单克隆抗体

所属期刊栏目：16

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省科技发展计划BJ97070

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：189-192