茶树咖啡酸氧甲基转移酶基因的克隆及原核表达

摘要：

以从茶树叶子中提取的总RNA为模板,结合RT-PCR利用RACE技术,得到咖啡酸氧甲基转移酶(caffeic acid o-methyltransferase,COMT)基因全长1 381 bp,其开放阅读框为1092 bp,编码393个氨基酸,推测的蛋白分子量约为39.661 9 ku,理论等电点为5.66,在GenBank的登录号为HM204933.其核苷酸序列与欧洲白桦、苎麻、中果咖啡和毛果杨的COMT基因相似性分别为80%、78%、77%、77%,氨基酸序列与毛果杨的COMT基因达100%.将该基因重组到表达载体pET-32a(+)中进行原核表达,经IPTG诱导,SDSPAGE检测结果表明茶树COMT基因能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,电泳检测到一条大约60 ku的外源蛋白,与预测的融合蛋白分子量相符.

关键词：茶树、咖啡酸氧甲基转移酶、RACE、原核表达

所属期刊栏目：20

分类号：S571.1

资助基金：唐仲英育种基金

在线出版日期：2011-09-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：139-143