牛病毒性腹泻病毒巢式 RT-PCR 检测方法的建立及应用

摘要：

参照多株不同基因型和基因亚型牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5'UTR 相对保守的基因序列,设计 3 对引物,其中1对能够扩增不同基因型 BVDV 5'UTR 片段(288 bp),另2对分别能够扩增 BVDV-1 型和 BVDV-2 型 5'UTR 片段(195 bp和116 bp).扩增片段大小与预计片段一致.对 PCR 反应条件进行优化,建立了一种特异、敏感的 RT-nPCR 检测方法.敏感性试验表明,敏感性为10-2TCID50/mL .特异性试验表明,对猪瘟兔化弱毒疫苗株、牛轮状病毒、牛传染性鼻气管炎病毒的检测结果均为阴性.通过对新疆部分地区无BVD 临床症状的牛场 208 份奶牛血样检测,阳性率为 50.43% ,表明该方法具有快速、简便、特异性强和灵敏度高等特点,可以作为 BVDV 隐性感染临床诊断的有效方法.

关键词：牛病毒性腹泻病毒、RT-nPCR、检测、应用

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分类号：S858.23(动物医学（兽医学）)

资助基金："973"计划前期研究专项2008CB117017;兵团博士资金项目2007JC15

在线出版日期：2011-01-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：6-9,15