华山松SRAP-PCR反应体系的优化

摘要：

为建立华山松SRAP-PCR反应体系,研究先采用L16 (45)正交设计对影响华山松SRAP反应的5个因子(DNA模板浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度、Taq酶)在4个水平上进行优化试验.结果表明:各因素对SRAP反应的影响依次为:Mg2+＞dNTPs＞ Taq酶＞DNA模板＞引物;对SRAP反应结果影响较大的3个因子(Mg2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶浓度)进行单因素试验;确立华山松SRAP反应最佳体系为:20μL的PCR体系中含有Mg2+ 2.2 mmol/L、dNTPs0.25 mmol/L、DNA模板60 ng、Taq酶0.8 mol/s、引物0.8μmol/L.将该体系用于华山松的SRAP扩增能获得稳定、清晰的多态性条带.

关键词：华山松、SRAP、反应体系

所属期刊栏目：27

分类号：S791.241.04(森林树种)

资助基金：贵州省自然科学基金项目黔科合J字[2008]2057;贵州省创新团队项目黔科合人才团队20114003

在线出版日期：2013-01-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：87-90,173