文冠果枝条韧皮部蛋白质双向电泳体系的建立

摘要：

以文冠果当年生硬枝韧皮部为材料,通过TCA/丙酮法提取总蛋白,研究了不同的蛋白质裂解液组成对双向电泳的影响,并在胶条选择、蛋白质上样量和等电聚焦时间等方面进行了优化.结果表明,TCA/丙酮提取法适用于提取文冠果韧皮部组织总蛋白,得到的图谱背景低,蛋白质点清晰；样品溶解于含有尿素和硫脲的蛋白质裂解液Ⅱ中,可显著地提高蛋白质的溶解性,获得的总蛋白溶液浓度远大于裂解液Ⅰ提取的总蛋白溶液浓度.在适宜的时间范围用超声波破碎仪处理蛋白质粉溶液有助于大幅度提高裂解液中蛋白质的浓度.等电聚焦条件宜根据样品特性选择,80000 Vh能够使得文冠果韧皮部蛋白质双向凝胶碱性端的横条纹大大减少.

关键词：文冠果、韧皮部、蛋白质提取方法、蛋白质裂解液、双向电泳技术

所属期刊栏目：27

分类号：S718.43(林业基础科学)

资助基金：国家自然科学基金30671673;国家林业局林业科学技术推广项目[2011]36

在线出版日期：2012-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：55-61