AG490抑制M2样巨噬细胞JAK2/STAT3通路影响胃癌细胞增殖和凋亡

摘要：

目的 探讨JAK2/STAT3 信号通路抑制剂 AG490 对 M2 样巨噬细胞功能表型的调控作用,以及对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响.方法 采用佛波酯(PMA)体外诱导人单核细胞系 THP-1 分化为 M0 型巨噬细胞,分别用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)诱导为 M1 样表型,IL-4 和 IL-13 诱导为 M2 样表型,并应用免疫荧光标记CD68、CD86 和 CD206 鉴定.RT-qPCR 检测巨噬细胞的 CD163、Arg1、CCL22、PPARγ、IL-10、IL-20 和 TNF-α的mRNA表达.Western blotting检测JAK2/STAT3 信号通路关键蛋白表达.JAK2/STAT3 抑制剂 AG490 处理 M2样巨噬细胞,检测 M2 表型的标志基因.分别将巨噬细胞与胃癌细胞共培养,通过 CCK-8 法、划痕实验、Transwell 小室基质胶侵袭实验及流式细胞术检测巨噬细胞对胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响.制备裸鼠 MKN45 胃癌异种皮下移植瘤模型,造模后连续 20d 观察肿瘤大小及质量.结果 AG490 处理的 M2 样巨噬细胞时,P38MAPK、JAK2、p-STAT3/STAT3 蛋白表达显著降低,Arg1、CCL22、PPARγ、IL-10 的 mRNA表达显著降低.M2 样巨噬细胞与胃癌细胞共培养可以促进胃癌细胞活力,增加迁移侵袭能力,并抑制凋亡.而 AG490 处理组 M2 样巨噬细胞与胃癌细胞共培养时,MKN-45 细胞和 MGC823 的增殖活力显著低于 M2 组(1.047±0.062 vs.1.426±0.076,1.149±0.006 vs.1.301±0.015);与M2 组相比,AG490 处理组的 MGC823 胃癌细胞迁移能力[(100.0±5.73)%vs.(72.0±3.85)%]和侵袭能力[(100.0±7.40)%vs.(60.0±6.54)%]显著降低.AG490 处理组的 MGC823 细胞凋亡率较 M2组显著增高[(27.51±0.70)%vs.(20.82±0.92)%].在裸鼠异种移植瘤模型中,第 20 天的 AG490 处理组移植瘤体积和质量显著低于M2 组[(736.04±182.34)mm3vs.(1 080.5±250.57)mm3,(0.64±0.11)g vs.(0.87±0.17)g].结论 AG490 抑制 M2 样巨噬细胞JAK2/STAT3 通路,部分逆转 M2 样巨噬细胞极化及其促癌功能,可抑制胃癌细胞增殖、迁移和侵袭,诱导凋亡.JAK2/STAT3 通路可作为胃癌治疗的潜在靶点进行深入研究.

关键词：胃癌、巨噬细胞、JAK2/STAT3信号通路、增殖、凋亡

所属期刊栏目：44

分类号：R735.2(肿瘤学)

在线出版日期：2023-10-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：709-716