白花蛇舌草总黄酮对肝细胞癌干细胞增殖及凋亡的影响
目的 探讨白花蛇舌草总黄酮(FOD)对 Huh7 来源的肝细胞癌干细胞增殖及凋亡的影响.方法 培养 Huh7细胞系,通过流式分选技术筛选出 Huh7 细胞系中 CD133 阳性的干细胞(CD133+-Huh7);流式分析术检测分选后CD133 阳性细胞比例;Western blotting实验检测分选纯化前后细胞干性指标 Nanog、Oct4、Sox2 的表达.分别用 0、50、100、400 μg/mL FOD分别作用CD133+-Huh7 肝细胞癌干细胞 24、48、72、96 h,应用 CCK8(Cell Counting Kit-8)法检测其对细胞增殖的影响;平板克隆实验检测各组细胞增殖能力变化;Annexin V-PE/7-AAD法检测各组细胞凋亡比例,并用 Western blotting法检测 p53、FAS-FADD、抗凋亡蛋白Bcl-2、促凋亡蛋白 Bax及凋亡指标 Cleaved-Caspae3等凋亡通路蛋白的表达.结果 纯化后的 Huh7 细胞的干性标志物 Nanog、Oct4、Sox2 表达更高.100 μg/mL FOD刺激CD133+-Huh7 干细胞 72 h,CCK8 实验结果显示其细胞增殖较阴性对照组(0 μg/mL处理组)降低(P<0.05),平板克隆实验亦显示其细胞增殖变弱;细胞凋亡比例较阴性对照组显著升高(P<0.05),抗凋亡蛋白 Bcl-2 表达降低而促凋亡蛋白Bax以及凋亡指标Cleaved-Caspae3 的蛋白表达升高,p53、FAS、FADD通路显著上调.结论 FOD可显著抑制CD133+-Huh7 肝细胞癌干细胞增殖,并显著促进细胞凋亡.
肝细胞癌、干细胞、白花蛇舌草总黄酮(FOD)、增殖、凋亡
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R735.7(肿瘤学)
西安交通大学第一附属医院医院科研发展基金国科金青年储备项目;陕西省重点研发计划基金资助项目
2023-05-29(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
389-395