双白莲合剂中对香豆酸的含量测定及其抑制食管癌细胞生长的机制

摘要：

目的 建立双白莲合剂中主要成分对香豆酸(p-coumaric acid,PCA)的含量测定方法,并探索其抗癌机制.方法 采用高效液相色谱法建立双白莲合剂中PCA的含量测定方法;采用CCK8法检测PCA对食管癌细胞的抗肿瘤活性作用,测定PCA对食管癌细胞的半抑制浓度;采用裸鼠成瘤实验研究PCA的体内抗肿瘤作用;采用Western blotting检测食管癌细胞和裸鼠肿瘤组织凋亡相关蛋白(cleaved caspase 3、cleaved PARP、Bad、Bcl-2、PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT)的表达.结果 双白莲合剂中PCA含量为16.84μg/mL,PCA线性回归方程为y=204402x+360904(15～40μg/mL),精密度实验标准偏差(relative standard deviation,RSD)为2.66％,稳定性实验RSD分别为2.35％、3.22％、1.58％、4.08％,重复性实验RSD为4.01％,加样回收率均值为97.83％,RSD值为6.16％.CCK8实验结果显示,PCA在食管癌细胞KYSE30和KYSE140的半数抑制率(IC50)分别为36μg/mL和55μg/mL;裸鼠荷瘤实验结果显示,给药30 d后,空白对照组小鼠的移植瘤体持续增大,而顺铂组(100μg/mL)、PCA组以及PCA联合顺铂给药均可有效抑制荷瘤小鼠移植瘤体的生长.此外,Western blotting结果显示,顺铂、PCA以及PCA联合顺铂均可以有效地提高瘤体组织和KYSE30、KYSE140食管癌细胞中cleaved caspase 3、cleaved PARP以及Bad的蛋白表达含量,同时降低瘤体组织和食管癌细胞中Bcl-2、p-PI3K和p-AKT的蛋白表达.结论 双白莲合剂中主要成分PCA含量为16.84μg/mL,液相色谱含量测定方法条件灵敏稳定;PCA可能通过调节PI3K/AKT/Bcl-2信号通路,诱导食管癌细胞凋亡,从而产生抗肿瘤活性作用.

关键词：双白莲合剂、对香豆酸、食管癌、PI3K/AKT/Bcl-2通路

所属期刊栏目：43

分类号：R285.5(中药学)

资助基金：广东省中医药局面上项目No.20221369

在线出版日期：2022-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：918-925