于脂肪源性干细胞的alphastatin肽胶质瘤靶向载体的构建及其对血管生成的抑制作用
目的 构建基于脂肪源性干细胞的alphastatin肽胶质瘤靶向载体并检测其体外抗血管生成作用.方法 构建alphastatin肽慢病毒表达载体并转染脂肪源性干细胞(adipose derived stem cell,ADSCs),构建基于ADSCs的alphastatin肽胶质瘤靶向载体,流式细胞仪检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体干细胞表面标志物表达情况,Western blotting及ELISA法分别检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体中及细胞培养上清液中alphastatin肽表达情况;细胞迁移实验检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体对CD133+胶质瘤干细胞趋向性;体外管腔形成实验检测alphastatin肽胶质瘤靶向载体在体外对内皮细胞血管生成的影响.结果 经转染后alphastatin肽胶质瘤靶向载体表达干细胞表面标志物与普通脂肪源性干细胞相比无明显变化;Western blotting结果显示,alphastatin肽胶质瘤靶向载体能够成功表达alphastatin肽;ELISA结果显示,在alphastatin肽胶质瘤靶向载体培养上清液中可检出alphastatin肽分泌[FLAG质量浓度(54.65±5.63)mg/L];细胞迁移实验显示,alphastatin肽胶质瘤靶向载体与普通脂肪源性干细胞对CD133+胶质瘤干细胞趋向性差异无统计学意义[迁移细胞数(106.67±2.41)个/HPF vs.(109.47±2.55)个/HPF,P>0.05];管腔形成实验显示,alphastatin肽胶质瘤靶向载体在体外能抑制内皮细胞介导的血管生成[管腔计数(7.27±0.31)个/HPF vs.(19.40±1.71)个/HPF,P<0.01].结论 在构建基于ADSCs的alphastatin肽胶质瘤靶向载体过程中,靶向载体干细胞生物学特性及肿瘤趋向性无明显改变,且能够稳定表达并分泌alphastatin肽并在体外对内皮细胞介导的血管生成具有抑制作用.
脂肪源性干细胞、alphastatin肽、胶质瘤干细胞、血管生成
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R730.5(肿瘤学)
国家自然科学基金;陕西省重点研发计划项目
2022-11-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共6页
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