膜联蛋白A5对胶质瘤细胞侵袭和迁移的调节作用及机制

摘要：

目的 研究膜联蛋白A5对胶质瘤细胞侵袭和迁移的调节作用及机制.方法 免疫组化法检测100例神经胶质瘤组织和20例正常脑组织中膜联蛋白A5的表达.对人神经胶质瘤细胞系(U251)转染靶向膜联蛋白A5的siRNA(si-Annexin A5组),并通过RT-PCR和蛋白印迹分析验证膜联蛋白A5表达下调.MTT实验和集落形成实验检测U251细胞的增殖能力,流式细胞术和Hoechst 33258染色检测U251细胞凋亡,伤口愈合实验和Matrigel Transwell侵袭实验观察U251细胞的迁移和侵袭能力.蛋白印迹分析U251细胞中Raf、p-Raf、MEK1/2、p-MEK1/2、ERK1/2、p-ERK1/2、c-Myc和E-Cadherin的表达.结果 与正常脑组织相比,胶质瘤组织中的膜联蛋白A5的mRNA表达升高了2.45倍,蛋白表达升高了2.87倍(P<0.001);Pearson相关分析显示,随着肿瘤级别的升高,膜联蛋白A5阳性率逐渐升高,并且肿瘤级别与阳性率呈正相关(r=1.000,P<0.001).与对照组相比,si-Annexin A5组的U251细胞在培养48、72h的细胞活力分别降低了29.46％和40.43％(P<0.001).与对照组相比,si-Annexin A5组的集落形成率降低了68.58％,而细胞凋亡率升高了24.41倍(P<0.001);si-Annexin A5组的迁移细胞率降低了65.35％,侵袭细胞率降低了68.80％(P<0.001);si-Annexin A5组的p-Raf、p-MEK1/2、p-ERK1/2和c-Myc的蛋白表达均明显降低(依次降低54.67％、70.37％、60.26％、54.95％),而E-Cadherin升高了3.58倍(P<0.001).结论 下调膜联蛋白A5通过抑制Raf/MEK/ERK信号通路抑制胶质瘤细胞的生长和运动能力,并诱导细胞凋亡.

关键词：神经胶质瘤、膜联蛋白A5、Raf/MEK/ERK信号通路、c-Myc、E-Cadherin

所属期刊栏目：42

分类号：R793.41(外国民族医学)

资助基金：陕西省自然科学基础研究计划No.2020JQ-509

在线出版日期：2021-03-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：272-279