大鼠主动脉内皮细胞改良型分离培养方法
目的 建立一种简便的大鼠主动脉血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)分离纯化及培养方法.方法 无菌条件下分离获得大鼠主动脉,在眼科显微器械的辅助下翻转暴露血管内膜.按处理方式的不同,将获得的主动脉血管段分为消化压片法组、单纯消化法组和单纯压片法组,并进行对应的处理和培养,通过倒置相差显微镜观察VECs形态,免疫荧光法鉴定VECs的细胞标记物.结果 消化压片法组在接种后48~72 h即有VECs自血管段中迁移出,原代细胞约10~11 d可达到近融合状态,子代细胞生长速度加快,5 d后达到融合状态,呈典型的"铺路石"样特征.相对于其他两组,消化压片法组VECs的迁移速度快、细胞数量多.免疫学鉴定显示细胞标志物Ⅷ因子、vWF和CD31的阳性率高达99%.所培养的VECs传代培养至第10代,未见明显的细胞形态特征变化,免疫荧光鉴定至第8代,未见明显的细胞免疫特征变化.结论 本研究成功建立了一种简单经济的大鼠主动脉VECs分离、纯化和培养方法.
大鼠、主动脉、血管内皮细胞、分离、纯化、细胞培养
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Q2-3
福建省医学创新项目2015-CXB-23;福建省自然科学基金面上项目2016J01574;国家自然科学基金面上项目81774369
2018-11-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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