人 CAP1蛋白真核表达及细胞定位与功能

摘要：

目的：构建 CAP1蛋白真核表达质粒并使之在细胞内得以表达,确定 CAP1蛋白在细胞中的定位及其对细胞迁移的影响。方法以 HeLa 细胞 cDNA 为模板,经 PCR 获取 CAP1编码区 cDNA,将该编码区 cDNA 序列插入 pC-MV-Myc 质粒中,构建带 Myc 标签的真核表达重组质粒。重组质粒转染至293细胞中,Western blot 方法检测其在真核细胞内的表达；重组质粒转染 HeLa 细胞,免疫荧光法检测其细胞内的定位,划痕实验观察其对细胞迁移的影响。结果成功构建了 CAP1真核表达重组质粒,并在真核细胞内成功表达,确定 CAP1定位于细胞质中,划痕实验证明CAP1过表达的细胞迁移能力明显下降。结论在真核细胞中成功表达了 CAP1重组质粒且 CAP1定位于细胞质,其过表达对细胞迁移有抑制作用,为研究 CAP1的生理功能奠定实验基础。

关键词：细胞骨架、肌动蛋白、CAP1、亚细胞定位、细胞迁移、重组质粒

分类号：R34(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目No.30960093,31160183,31270894,31470827 Supported by the National Natural Science Foundation of China 30960093,31160183,31270894 and 31470827

在线出版日期：2016-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：195-198,203