野生型p53/junB融合基因真核表达载体的构建
目的 通过构建抑癌基因野生型p53(wtp53)与核转录因子junB的融合基因真核表达载体,为进一步研究联合基因疗法在肝癌中的应用奠定一定的基础.方法 运用PCR(polymerase chain reaction)、RT-PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR)、基因重组技术构建携带增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluoresent protein, EGFP)报告基因的wtp53/junB融合基因真核表达载体pEGFP-C1-wtp53/junB.通过观察绿色荧光定位的方法验证wtp53/junB融合基因的真核表达载体转染人肝癌细胞株HepG2的情况.结果 成功地将p53/junB融合基因克隆到pEGFP-C1质粒中,其序列与设计的完全一致;转染人肝癌细胞株HepG2后可观察到绿色荧光定位于细胞核中,证明wtp53/junB融合基因成功转染入肝癌细胞株中.结论 成功构建了携带EGFP的pEGFP-C1-wtp53/junB融合基因真核表达载体,并转染入人肝癌细胞核中,为进一步研究两者在肝癌中的协同作用奠定了基础.
wtp53、junB、HepG2、融合基因、肝细胞癌
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Q78(基因工程(遗传工程))
陕西省科技攻关项目资助No.2007K09-05Supported by the Sci-tech Research Project of Shaanxi Province 2007K09-05
2010-03-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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