蛋白酶活化受体-1单克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

目的 制备蛋白酶活化受体-1(PAR-1)单克隆抗体(mAb).方法 以PAR-1特异性片段为免疫原(13肽)免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗PAR-1 mAb.采用捕获酶联免疫吸附试验(capture ELISA)鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、Dot blot、免疫组化染色法、流式细胞仪分析、激光共聚焦显微镜技术鉴定mAb的特异性.结果 获得2株可稳定分泌抗PAR-1 mAb的杂交瘤细胞,其亚型分别为IgM、IgG2b.免疫组化染色表明,mAb与人扁桃体、结肠组织中的淋巴细胞、包皮组织中的成纤维细胞、肺组织中的巨噬细胞反应呈阳性.流式细胞仪分析显示,2株mAb与人肺腺癌细胞系A549细胞胞浆内及细胞膜上的PAR-1均呈阳性反应.激光共聚焦扫描显微镜观察,荧光标记的阳性反应物在A549细胞胞浆内及细胞膜上均可见.结论 成功地制备出抗PAR-1 mAb,为进一步研究炎症性疾病提供有用的试剂.

关键词：蛋白酶活化受体-1、单克隆抗体、酶联免疫吸附试验

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金30471601;广东省科技计划2003B31502;广东省自然科学基金04106122;李嘉诚先生捐资款专项经费资助项目C0200001

在线出版日期：2007-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：458-461