两种原代培养方法对血管平滑肌细胞收缩表型的影响

摘要：

目的：探究胶原酶消化法和植块法培养原代血管平滑肌细胞（VSMCs）对细胞收缩表型影响的特点。方法：使用II型胶原酶消化法和植块法分别离体培养原代VSMCs，并获取第1代、第2代、第4代、第8代、第12代VSMCs，Western blot检测不同代数表型标志蛋白α平滑肌肌动蛋白（SMA-α）、调宁蛋白（calponin）和骨桥蛋白（OPN）表达情况；随后检测不同培养方法间表型标志蛋白表达差异，并用划痕实验和MTT实验检测迁移、增殖水平，免疫荧光检测SMA-α胞内表达。结果：消化法最初可获得明显优于植块法的VSMCs收缩表型，表现为SMA-α和calponin高表达，OPN较低表达，增殖、迁移能力相对较弱。培养至第8代后，2种方法的细胞都发生显著的表型改变，增殖、迁移能力增强且消化法细胞呈现更强的去分化表型趋势。结论：II型胶原酶消化法可快速获得良好收缩表型的VSMCs，在第4代前具有优于植块法的收缩表型。

关键词：血管平滑肌细胞、表型、细胞去分化、细胞分离、原代培养

所属期刊栏目：46

分类号：Q254;Q2-33(细胞生理学)

资助基金：浙江省自然科学基金资助项目LY14H020002；浙江省医药卫生培育计划2015PYA013。

在线出版日期：2017-02-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：859-864