人肠三叶因子重组真核表达载体的构建及在CHO/dhfr-细胞中的稳定表达

摘要：

目的：构建人肠三叶因子（hITF）重组真核表达载体，并检测其在CHO/dhfr-细胞中的表达。方法：通过重叠延伸PCR法获得hITF cDNA片段，将目的基因插入真核表达载体pIRES/dhfr，得到重组真核表达载体pIRES/hITF/dhfr；经脂质体介导转染CHO/dhfr-细胞，通过G418筛选，建立稳定转染的CHO/dhfr-细胞系；用RT-PCR及ELISA法检测hITF的表达。结果：成功构建了重组真核表达载体pIRES/hITF/dhfr，并建立了稳定转染的CHO细胞系，成功地表达了目的基因。结论：成功构建了重组真核表达载体pIRES/hITF/dhfr，并在CHO/dhfr-细胞中分泌表达hITF蛋白，为进一步进行重组hITF的临床前研究奠定良好的实验基础。

关键词：人肠三叶因子、真核表达载体、CHO/dhfr-细胞

所属期刊栏目：46

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：浙江省自然科学基金资助项目Y207422；浙江省医药卫生科学研究基金2007A137；温州市科技局合作项目H20090010。

在线出版日期：2016-07-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：561-565