缺氧条件下RhoA/Rho激酶及eNOS在血管内皮细胞表达的研究

摘要：

目的：建立稳定的体外细胞缺氧模型，探讨人体脐静脉内皮细胞（HUVEC）在缺氧条件下RhoA蛋白和Rho激酶对其内皮细胞内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响。方法：利用jetPEI-HUVEC、siRNA分别转染SH-SY5Y细胞、HEK293细胞和HUVEC后制备体外细胞缺氧模型，通过细胞裂解对相关蛋白进行免疫印迹分析。结果：常氧条件下RhoA蛋白在HUVEC中表达水平较低，但在缺氧条件下培育5 h后表达增加，同时缺氧3 h后Rho激酶表达增加，5 h后达高峰，而eNOS的表达恰恰相反。缺氧条件下，活化型RhoA蛋白下调eNOS的表达，而siRNA使RhoA蛋白表达减少从而上调eNOS的表达；Rho结合域抑制Rho激酶活性而上调eNOS的表达。结论：RhoA蛋白和Rho激酶的表达及活化抑制内皮细胞中eNOS的表达，因此可以通过某些药物如他汀类或Rho激酶抑制剂，抑制RhoA蛋白和Rho激酶的活性，从而增加eNOS的表达水平，对心脑血管疾病产生保护作用。

关键词：Rho激酶、内皮型一氧化氮合酶、内皮细胞、RhoA、siRNA

所属期刊栏目：46

分类号：R743.9(神经病学与精神病学)

资助基金：浙江省医药卫生一般研究计划项目2015KYA227。

在线出版日期：2016-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：321-325