重组人EGF-IL-18融合蛋白直接竞争ELISA方法的建立

摘要：

目的:建立检测给药食蟹猴血清中重组人表皮生长因子-白介素-18 (rhEGF-IL-18)融合蛋白含量的直接竞争ELISA方法,为该融合蛋白的动力学研究提供方法学.方法:用棋盘法确定包被抗体和酶标抗原工作浓度,建立直接竞争ELISA方法,并对其进行方法学评价.结果:包被抗体和酶标抗原的最适工作浓度为4 μg/mL和1∶1 000.建立的标准曲线的曲线范围为100～ 900 ng/mL,R2为0.9898;日内精密度和日间精密度的最大变异系数分别为2.42％和2.20％;回收率95.3％ ～103.0％;样品在室温放置1 h、冻融2次和冻存20 d三种条件下检测结果均较稳定,相对标准差均小于15％;定量下限为20.0 ng/mL.结论:本研究建立的ELISA方法稳定且可行.

关键词：重组人表皮生长因子-白介素-18融合蛋白、直接竞争ELISA、方法学评价

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分类号：R331(人体生理学)

资助基金：浙江省重大科技专项2009C13038;浙江省临床检验诊断学重中之重学科和浙江省重点科技创新团队资助项目2010R50048

在线出版日期：2014-08-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：485-488