10.3969/j.issn.1000-2138.2008.05.013
氯胺T法标记B7-2单抗6C8的方法学研究
目的:建立125I标记B7-2单抗6C8的方法,探讨其最佳标记条件.方法:氟胺T法标记单抗6C8,改变标记条件:抗体的量分别为3μg、6μg、9μg、12μg;125I的活度分别为0.925 MBq、1.85 MBq,3.7 MBq、7.4 MBq、14.8 MBq;CH-T的量分别为10μg、20μg、30μg、40μg、50μg;反应时间分别为30 s、1 min、2 min、4 min;每次实验均重复3次,根据实验结果调整标记条件.标记好后,找出最佳标记条件,在生理盐水和人血清中分别作不同时间的标记率稳定性测定,以30 min、1 h、2 h、4 h、6 h,24 h为时间点,选出标记率最高的时间点.纸层析法测定标记率及放化纯.结果:抗体量对标记率没有影响;Na125I3.7 MBq时标记率为(74.53±5.12)%,放化纯为(90.40±3.01)%;CH-T 20μg时标记率为(81.00±14.75)%,放化纯为(95.17±4.45)%;反应时间30 s时标记率为(80.67±13,32)%,放化纯为(88.93±10.16)%.室温下放置3 d标记率为(83.12±8.47)%,加八人血清后放置24 h标记率为(5.23±0.90)%.结论:上述氯胺T法最佳标记条件为:Na125I 3.7 MBq,氯胺-T 20μg,6C8抗体6μg,Na2S2O5 μg,反应时间30 s.该方法具有较高的标记率和较差的稳定性.
碘、同位素标记、抗原、CD80、抗体、单克隆
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R743(神经病学与精神病学)
2008-12-02(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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