β-1,3-葡聚糖酶在枯草芽孢杆菌中的表达与性质

摘要：

藤黄节杆菌(Athrobacter luteu)β-1,3-葡聚糖酶(βglⅠ)能够特异性的作用于β-葡聚糖中的β-1,3-糖苷键,在酵母裂解活性上具有突出优势,但是βglⅠ在生产上存在表达低、生产成本高的问题.作者利用无缝克隆技术构建表达载体,实现了βglⅠ在枯草芽孢杆菌中的分泌表达,并通过比较不同Tat类型和Sec类型信号肽、RBS、5'UTR等表达元件来提高βglⅠ的胞外产量.结果 表明,信号肽SPLipA使得βglⅠ表达水平提高了0.4倍,在此信号肽基础上继续比较各RBS和5'UTR序列,其中cry3A 5'UTR使βglⅠ产量高出出发菌株1.2倍.此外,利用Ni2+亲和层析柱纯化βglⅠ并对其酶学性质进行研究,结果表明该酶的最适反应温度为50℃,最适反应pH为6.0,在0～45℃、pH 4.0～9.0的范围内稳定性较好,比活为973 U/mg.

关键词：βglⅠ;枯草芽孢杆菌;分泌表达;信号肽;RBS;5’UTR

所属期刊栏目：41

分类号：Q814.4(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金31671799

在线出版日期：2022-03-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：29-36