农杆菌介导转化黑曲霉条件优化及脂肪酶表达

摘要：

优化了农杆菌介导转化黑曲霉的方法,优化条件包括共培养材料、农杆菌种类、诱导剂浓度、共培养时间、共培养温度以及共培养时农杆菌的菌体浓度.结果 表明,农杆菌介导转化黑曲霉的最适条件为107个/mL不萌发的新鲜孢子与OD600培养至0.9～1.0的农杆菌以1:1的比例混合后,在乙酰丁香酮浓度为200 μmol/L的IM平板上,23℃避光培养48 h后进行转膜,转化子个数可达到(60±5)个转化子/106个孢子,且阳性率达到90％以上.并且构建了同源黑曲霉脂肪酶的组成型和诱导型启动子表达载体,通过优化后的农杆菌介导转化方法转化至黑曲霉中,利用罗丹明橄榄油平板对产酶转化子进行筛选鉴定,并获得了阳性克隆.

关键词：农杆菌转化、双元载体、黑曲霉、脂肪酶、优化

所属期刊栏目：39

分类号：Q785(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金面上项目;江苏省“六大人才高峰”计划项目;江苏高校品牌专业建设工程资助项目

在线出版日期：2020-07-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：51-58