共表达分子伴侣提高漆酶在毕赤酵母中的分泌

摘要：

通过共表达分子伴侣的策略提高漆酶在毕赤酵母中的产量.前期基于Pichia pastoris密码子偏好性,合成了来源于Cerrena sp.WR1的漆酶基因,克隆至pPIC9K,转化Pichia pastoris GS115,得到重组菌株PP-L.在PP-L 中,分别过量表达蛋白质折叠(BIP、ERO1)、囊泡运输(SEC53、SEC1)、胁迫应激(HAC1、GCN4)相关的6种分子伴侣.结果显示,共表达这6种分子伴侣对分泌表达漆酶的菌株PP-L 的正常生长没有影响;共表达BIP 使重组菌胞外酶活提高359％,共表达ERO1胞外酶活反而降低22％;共表达其它4种分子伴侣对胞外酶活提高18％～53％.组合共表达BIP和HAC1的重组菌P1较PP-L胞外酶活提高了602％,酶活达到3 896 U/L.推测由于强化内质网中BIP水平进而提高了蛋白质折叠能力,从而提高其分泌效率.该研究结果将有助于发酵法生产漆酶的工业化.

关键词：漆酶、毕赤酵母、分子伴侣、共表达、分泌表达、蛋白质折叠

所属期刊栏目：38

分类号：Q815(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金项目;江苏省重点研发计划社会发展项目

在线出版日期：2020-03-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1-8