D-甘露糖异构酶的克隆表达及酶法制备D-甘露糖

摘要：

将大肠杆菌BL21中的D-甘露糖异构酶(MIase)基因ihS克隆到表达载体pET-28a(+)中,并转入大肠杆菌BL21 (DE3)感受态细胞中表达.重组菌株经IPTG诱导培养6h后MIase发酵酶活可达4.2 U/mL.重组MIase生产D-甘露糖时不需要金属离子的参与.该酶在40℃和pH 7.5条件下表现出催化D-果糖的最高活性,转化率为25％左右;通过研究底物浓度对酶活性的影响,得出该酶的活性不受底物浓度的抑制,以D-果糖为底物时,动力学参数Km为123.32mmol/L,Vmax为113.64 μmol/(min· mg),催化效率kcat/Km为0.691(s·mmol/L).

关键词：D-甘露糖、D-甘露糖异构酶、表达、生物制备

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分类号：Q814.1(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家863计划项目2013AA102102;国家自然科学基金项目31230057

在线出版日期：2019-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：58-63