硫氧还蛋白促进人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中高效可溶表达

摘要：

为实现人胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在大肠杆菌中的高效可溶表达,获得大量具生物活性的IGF-1.应用融合PCR技术构建trx-igf1融合基因,克隆至pET30a载体.重组载体pET30a-Trx-IGF-1转化大肠杆菌C43(DE3),并进行条件优化大量表达可溶性蛋白Trx-IGF-1.利用His标签纯化表达产物,对纯化蛋白进行Western blot与生物活性分析.构建的pET30a-Trx-IGF-1重组载体转化大肠杆菌C43 (DE3)后,在30℃培养条件下1 mmol/L IPTG诱导表达5h,获得大量以可溶形式表达的融合蛋白Trx-IGF-1;采用Ni离子亲和层析,获得纯度达90％以上的融合蛋白,经Western blot检测具有IGF-1抗原活性.生物学活性检测显示,融合蛋白Trx-IGF-1能明显促进NIH3T3细胞增殖及细胞周期进展.本研究应用的载体蛋白Trx,能实现在大肠杆菌中高效可溶表达具生物活性的IGF-1,为包涵体蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达提供借鉴.

关键词：胰岛素样生长因子-1、硫氧还蛋白、大杨杆菌C43 (DE3)、可溶、生物活性

所属期刊栏目：38

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家863计划项目2014AA021003

在线出版日期：2019-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：50-57