环介导等温扩增技术与横向流动试纸条法快速检测布鲁氏杆菌

摘要：

将环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)与横向流动试纸条技术(Lateral flow dipstick,LFD)联合应用,建立了一种快速、便捷的布鲁氏杆菌检测方法.针对布鲁氏杆菌OMP25基因设计4条特异性引物和1条异硫氰酸荧光素(Fluorescein isothiocyanate,FITC)标记的探针.生物素标记LAMP扩增产物能够特异性地与FITC标记的探针杂交,杂交产物经LFD检测.优化后的扩增温度和时间为63℃反应50 min,加上样品的前处理,完成检测仅需80 min.LAMP-LFD方法可特异性地检出布鲁氏杆菌,其最低检测限为5.4x100CFU/mL,是利用外引物建立的PCR方法的100倍.试验结果表明,本研究建立的LAMP-LFD方法能够快速、特异地检测布鲁氏杆菌;简单经济,不需要其他辅助仪器,结果即可直观判断;适合基层实验室、应急检测或现场监测等使用,具有较高的推广价值.

关键词：布鲁氏杆菌、OMP25基因、环介导等温扩增、横向流动试纸条、检测

所属期刊栏目：36

分类号：S855.1+2(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家863计划项目2012AA101605

在线出版日期：2018-01-31（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：1276-1282