黑曲霉葡萄糖氧化酶基因在毕赤酵母SMD1168中的表达

摘要：

在毕赤酵母SMD1168中利用乙醇氧化酶AOX1强启动子表达黑曲霉葡萄糖氧化酶(Glucose oxidase,GOD).提取黑曲霉Aspergillus niger PCTC的基因组DNA,以此为模板进行PCR扩增获得葡萄糖氧化酶基因,将目的基因插入到具有AOX1强启动子的表达载体pPICZαA上,经电转化导入毕赤酵母SMD1168中.经zeocin抗性平板初筛、摇床复筛以及SDS-PAGE蛋白质电泳的检测,获得了一株产葡萄糖氧化酶活力的菌株,该株菌在30℃、200 r/min的培养条件下,经体积分数1.0%的甲醇诱导发酵1 d可获得1.12 U/mL的酶活.对该菌株进行了摇瓶产酶条件优化,其最佳发酵条件为:在pH 5、30℃下经体积分数1.5%甲醇诱导7 d,酶活为32 U/mL.

关键词：葡萄糖氧化酶、黑曲霉、毕赤酵母、异源表达、启动子

所属期刊栏目：36

分类号：TQ920.1(其他化学工业)

资助基金：中央高校基本科研业务费专项资金项目JUSRP111A24;江苏省高校优势学科建设工程项目111206

在线出版日期：2017-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：975-981