重组大肠杆菌产双乙酰还原酶的发酵条件优化

摘要：

光学纯2,3-丁二醇是重要的手性合成砌块.采用双乙酰还原酶催化还原双乙酰底物是一种合成光学纯2,3-丁二醇的绿色方法.作者在摇瓶中对产双乙酰还原酶重组大肠杆菌的发酵培养基及诱导条件进行了优化.优化后的发酵培养基组成为:甘油5 g/L,酵母浸膏10 g/L,鱼粉蛋白胨5 g/L,(NH4)2SO41.5 g/L,柠檬酸钠5 g/L,KH2PO41 g/L,MgSO4·7H2O 0.5 g/L,NaCl 2 g/L;优化后的诱导条件为37℃,IPTG终浓度为0.1 mmol/L.在优化培养基中,37℃和0.1 mmol/L IPTG条件下诱导发酵6 h,单位菌体(干重)产双乙酰还原酶量达13.84 kU/g,产酶水平达33.65 kU/L,分别为基础培养基的2.04和4.23倍,LB培养基的1.16和1.71倍.在此最优条件,在3 L发酵罐中进行了重组大肠杆菌产双乙酰还原酶的验证,发酵8h时酶活最高,单位菌体产双乙酰还原酶量达14.09 kU/g,产酶水平达64.62 kU/L.本研究为高效制备可用于不对称还原合成光学纯2,3-丁二醇的双乙酰还原酶奠定了基础.

关键词：重组大肠杆菌、双乙酰还原酶、发酵培养基优化、诱导条件优化

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分类号：Q93(微生物学)

资助基金：国家自然科学基金项目21276112;国家973计划项目2011CB710800

在线出版日期：2017-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：944-950