不同类型连接肽对β-甘露聚糖酶AuMan5A酶学性质的影响

摘要：

以柔性肽F(GGGGS)3或刚性肽R(EAAAK)3为连接肽,将海栖热胞菌27家族碳水化合物结合域(CBM27)与宇佐美曲霉5家族β-甘露聚糖酶(AuMan5A)的C末端融合,探讨不同类型连接肽对AuMan5A酶学性质的影响,获取具有优良酶学性质的融合酶.采用重叠PCR技术扩增融合酶基因Auman5A-F-cbm27和Auman5A-R-cbm27,分别将Auman5A和融合酶基因在毕赤酵母GS115中进行表达,分析表达产物reAuMan5A、reAuMan5A-F-C和reAuMan5A-R-C的酶学性质.结果表明:该3种β-甘露聚糖酶对角豆胶的Km值分别为1.7、1.9和0.9 mg/mL.3种酶的最适温度Topt分别为70、65和70℃;reAuMan5A-F-C和reAuMan5A-R-C在70℃的半衰期t170/2分别为36 min和124 min,较reAuMan5A的(t170/2=9 min)延长了3倍和12.8倍.reAuMan5A-R-C具有底物亲和力强、热稳定性高和pH稳定范围广等特点,在食品、饲料、医药和能源等领域有着巨大的应用潜力.

关键词：连接肽、β-甘露聚糖酶、融合酶、底物亲和力、热稳定性

所属期刊栏目：36

分类号：TS201.25(食品工业)

资助基金：国家自然科学基金项目31271811;江苏省普通高校研究生科研创新计划项目KYLX-1170

在线出版日期：2017-11-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：938-943