谷氨酸棒杆菌中谷氨酰胺合成酶的克隆表达及固定化

摘要：

对谷氨酸棒杆菌(C.glutamicum)来源的谷氨酰胺合成酶进行腺苷酰化位点定点突变,并在大肠杆菌中进行异源表达,得到的重组酶活为6.215 U/mg分离纯化重组突变酶后,对其固定化条件及固定化酶的性质进行研究结果得到固定化条件为:以LX-1000EP树脂作为固定载体,载体量0.176 g/U、pH值8.0、温度30℃、吸附时间16h 固定化酶活力达到3.658 U/g,酶活回收率达到67.17％ . 重组酶固定化后,反应最适温度没有变化,最适pH略向碱性偏移,储藏稳定性提高,转化谷氨酸生产谷氨酰胺的水平与游离酶相当,对50 mmol/L谷氨酸的转化率为92.83％,为酶法生产谷氨酰胺后续研究提供了参考.

关键词：重组谷氨酰胺合成酶、克隆表达、固定化、生物转化

所属期刊栏目：35

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2016-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：883-889