一种SUMO-Heparinase Ⅰ融合酶的可溶性表达与纯化

摘要：

克隆自肝素黄杆菌(Flavobacte riumheparinum)的肝素酶Ⅰ(Heparinase Ⅰ,EC4.2.2.7)广泛应用于低相对分子质量肝素(LMWH,low molecular weight heparin)制备研究.然而,该酶在大肠杆菌表达体系中易形成包涵体,限制了其大量应用.将可溶性配体SUMO (small ubiquitin-likemodifier,小泛素类似修饰蛋白质)与C端带有6×His标签的肝素酶基因片段N-端融合表达,菌体总蛋白质和可溶性蛋白质SDS-PAGE电泳表明,N端融合SUMO的肝素酶Ⅰ可溶性表达比率显著提高;通过镍-亲和柱层析得到均一纯化的融合肝素酶Ⅰ,融合酶酶学性质表明该融合酶可直接应用于肝素降解而无需切除SUMO标签,为肝素酶Ⅰ的广泛应用提供了良好的技术基础.

关键词：肝素酶Ⅰ、小泛素类似修饰蛋白质、融合表达、可溶性表达

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分类号：O629.12(有机化学)

资助基金：教育部博士点基金项目20110093110008

在线出版日期：2016-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：318-323