化学修饰提高谷氨酰胺转胺酶活性与热稳定性

摘要：

谷氨酰胺转氨酶(EC 2.3.2.13,简称TGase)是一种催化转酰基反应,导致蛋白质分子间发生交联的酶,广泛应用于食品、纺织、皮革、医药等领域.为提高TGase比活力与热稳定性,作者以邻苯二甲酸酐为修饰剂,对重组吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)TGase分子赖氨酸残基进行化学修饰.确定最佳修饰条件为:pH 8.0、20℃修饰反应2h、TGase表面氨基与PA摩尔比为1∶2.无胱胺(TGase的竞争性抑制剂)存在时,PA修饰使TGase比活力提高48.3％;10mmol/L胱胺存在时,PA修饰使TGase热稳定性提高31.3％.晶体模拟结构显示,21个赖氨酸残基位于S.hygroscopicus TGase分子表面,其中5个位于催化活性中心附近区域.表面疏水性分析发现,不同条件的PA修饰使TGase分子表面疏水度降低9.46％～21.13％.因此,PA可能通过改变TGase分子不同区域的疏水性来提高其比活力和热稳定性的.上述结果表明,PA修饰是一种改进TGase酶学性质的有效策略,为其后续的分子改造提供了一定的理论参考.

关键词：谷氨酰胺转胺酶、邻苯二甲酸酐、比活力、热稳定性、表面疏水度

所属期刊栏目：34

分类号：Q814(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金项目31171639;江苏省自然科学基金项目BK20130132

在线出版日期：2016-03-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1135-1140